chromatographia, etiam "analysis chromatographica", "chromatographia" appellata, est modus separationis et analysis, quae longe late patet applicationes in chemia analytica, chemia organica, biochemia aliisque agris.
Conditor chromatographiae botanicis Russicus est M.Tsvetter.Anno 1906, botanicus Zvetter Russicus eventus experimenti sui edidit: ut pigmenta plantarum separaret, petrolei extractum aethereum in quo pigmenta plantarum in tubo vitreo continentem pulverem calcii carbonatis elusit et cum petroleo aethere a summo ad imum elusit.Quia pigmenta diversae facultates adsorptiones habent in superficie calcii particulis carbonatis, cum processu leaching, variae pigmenta variae velocitates movent, ita vincula diversorum colorum formantes.Pigmenta tium separata sunt.Hanc separationis methodum chromatographia nominavit.
Repraesentatio schematica plantae experimentalis pigmenti folium separationis
Per continuam separationis methodorum progressum, substantiae magis magisque colores fiunt obiectum separationis, chromatographia etiam paulatim significationem "coloris" amisit, sed nomen hodie quoque in usu est.
Chromatographic genus
Essentia chromatographiae est processus in quo moleculae separandae sunt inter tempus stationarium et tempus mobile partita et aequata.Substantiae diversae aliter inter duas gradus partita sunt, quae eas diversis velocitatibus motu mobili moveri facit.Motu temporis mobilis, diversa elementa mixtionis inter se in stationariis partibus separantur.Secundum mechanismum in varia genera dividi potest.
I, secundum statum corporis duo periodi classificationem
Mobilis periodus: chromatographia Gas, chromatographia liquida, chromatographia fluida supercritica
Tempus stationarium: gas-solidum, gas-liquidum;Liquid-solidus, liquid-liquid
2, secundum formam periodi stationarii classificationis
chromatographia columna: chromatographia columna referta, columna capillaris chromatographia, columna chromatographia micropacked, chromatographia praeparativa.
Chromatographia plana: chromatographia charta, chromatographia tenui iacuit, chromatographia polymerorum
3, secundum separationem mechanismi indicatur
Adsorptionis chromatographiae: variae partes separantur secundum suas adsorptiones et desorptiones facultates in adsorbentibus.
Partitio chromatographia: Diversa membra secundum earum solubilitatem in solvendo separantur
Moles exclusio chromatographia: secundum magnitudinem moleculares separationis magnitudine in ion commutant chromatographiam: variae partes affinitatis cum resinae separationis ion-commutatione.
Affinitas chromatographia: Separatio utens praesentia certae affinitatis inter macromoleculas biologicas
Electrophoresis capillaris: partes separatae sunt secundum differentias mobilitatis et/vel partitionis morum
Chromatographia chiralis adhibetur ad separationem et analysim medicamentorum chiralium, quae in tria genera dividi possunt: derivatio chiralis methodi gerentis;Chiralis mobilis methodus elogia;Chiral stationarium Phase resolutio methodi
Basic terminologiae chromatographiae
Curvae ex consilio responsionis significationibus partium post detectionem separationis chromatographicae contra tempus consecutae chromatogrammata vocantur.
Baseline:Sub quibusdam conditionibus chromatographicis, curva signi generati cum solum mobile per systema detectoris transit, baseline appellatur, sicut in linea ot ostenditur.Cum conditio experimentalis stabilis fuit, baseline erat recta axi horizontali parallela.In baseline strepitum instrumenti, maxime detectoris, in tempore reflectit.
Picus altitudo;distantia verticalis inter chromatographicam apicem punctum et baseline, per h denotatur, ut in linea AB ostensum est.
Regio latitudo;Regionis latitudo culminis chromatographici directe ad efficientiam separationis refertur.Ad apicem latitudinis chromatographicae describendas tres modi sunt: vexillum declinationis σ, apicem latitudinis W, FWHM W1/2.
Standard declinatio (σ);Dimidiata σ est distantia inter duo puncta inflexionis in normali curva distributione, et valor σ indicat gradus dispersionis partium ab columna.Quo maior valor σ, eo magis diffluentes partes dispelluntur, et in peius effectus separatio.E contra effluentia conducunt, et bonum separatio effectus est.
Picus latitudo W;Intersectio puncta utrinque cacuminis chromatographici tangentes lineas adhibentur, et interceptus in baseline apicem latitudinis seu basilineae latitudinis appellatur, quod etiam ut W exprimi potest, ut in Figura IJ.Secundum principium normalis distributionis, relatio inter apicem latitudinis et vexillum declinationis probari potest W=4σ.
W1/2:Vertex latitudinis mediae altitudinis FWHM dicitur, ut patet per distantiam GH.W1/2=2.355σ, W=1.699W1/2.
W1/2, W et ab σ derivantur et arearum apicem computare solent praeter effectum columnae metientes.FWHM mensura est commodior et frequentior.
breviter
Ex chromatographico apicem curvae fluxum, proposita sequentia obtineri possunt:
a, Analysis Qualitativa fiebat secundum retentionem valoris chromatographicorum cacumina
b, quantitatis analysis secundum aream vel apicem chromatographic apicem
C. Separatio efficientia columnae aestimata est secundum retentionem pretii et cacumen latitudinis chromatographicae cacuminis.
Formulae calculi, qui in chromatographia versantur
1. retentionis valorem
Retentionis valor parameter usus est ad describendum gradum ad quem componentia specimen in columna retinetur et ut signum characterisationis chromatographicae adhibetur.Repraesentationis methodus talis est:
Retention tempus tR
Tempus mortistM
Accommodare retention tempus tR'= tR-tM
(Summa tempus spent in stationariis)
Volumen retentionis
VR=tR*F. (dependens mobilis tempus velocitatis)
Mortuus volumen
VM=tM*Fc
(Spatium non occupatum a periodo stationario in via fluunt ab injectore ad detectorem)
Adjust retentionis volumen VR'= t'R*Fc
2. Retentione relativa pretii
Valor retentionis relativa, etiam nota factoris separationis, partitio rationis coefficientis vel factoris capacitatis relativa, est proportio retentionis temporis (volumi) probatae componentis ad tempus retentio accommodatum (volumen) vexillum sub certis conditionibus chromatographicis.
Valores retentionis relativi ad influentiam quarundam conditionum operativarum tollendam adhibitae sunt, ut rate fluunt ac detrimentum fixativae, in retentione valorum.Vexillum in retentione relativae pretii component esse potest in exemplo probato vel composito artificiose addito.
3. retentionis index
Retentionis index est retentionis index substantiae i ut in solutione certa probetur X. Duae n-alanes selectae sunt in substantias referentes, quarum altera N carbonis numerum habet, altera N+n habet.Tempus retentionis accommodata est t 'r (N) et t 'r (N+n), respective, ita ut retentionis temporis t 'r (i) substantiae i probetur, prorsus inter eos, id est, t»r (N).
Retentionis index sic computari potest.
4. Facultas factor (k)
In aequilibrio ratio massae componentis in tempore stationario (m) ad tempus mobile (m), elementum capacitatis appellatur.Formula haec est:
5、 Partitio coëfficientis (K) In aequilibrio, ratio retrahitur componentis in periodo stationario (m) ad tempus mobile (m), quod vocatur partitio coefficientis.Formula haec est
Relatio inter K et k:
Reflectat columnae genus eiusque nodum magni momenti proprietates structurae
breviter
Relatio inter retentionem valoris et capacitatis factoris et partitionis coefficientis;
Separatio chromatographica fundatur in differentia adsorptionis vel dissolutionis facultatis uniuscuiusque componentis in certo exemplo relativo, quod quantitative exprimi potest ex magnitudine divisionis coëfficientis K (vel factoris capacitatis k) valoris.
Partes cum validis adsorptionis vel dissolutionis facultatibus magnam partitionem coefficientem (vel factorem capacitatis) habent et longum tempus retentio.Vicissim, elementa cum adsorptione infirma vel solubilitate habent parvam partitionem coefficientem et brevem retentionis tempus.
Basica theoria chromatographiae
1. Tray doctrina
(1) Propone - thermodynamic
Propositum est exemplar laminae cum turri a Martino et Synge propositae.
Columna fractura: in lance saepius aequilibrii gasi liquidi, secundum punctum fervens diversae separationis.
Columna: Partes multiplices partitiones inter duas gradus aequantur et secundum coefficientes diversae partitionis seiunguntur.
(2) Hypothesis
(1) Sunt multa fercula in agmine, et partes cito ad aequilibrium distribuendum intra lancem, id est altitudinem lance.
(2) Mobilis periodus intrat in columnam, non continue, sed pulsans, id est, uterque locus est columnae volumen.
(3) Cum specimen aliquod bracteae columnae adiectae sint, diffusio exempli in axe columnae neglecta est.
(4) Partitio coefficiens aequalis est omnibus ferculis, extra quantitatem partium.Hoc est, partitio coefficientis in utroque tabano constans est.
(3) Principium
Ipsumque schemate theoria schematica
Si massae unitatis componentium, nempe m=1 (exempli gratia 1mg seu 1μg), addatur No. 0 lance, et post aequilibrium dividendum, quia k=1, nempe ns=nm, nm=ns=0.5.
Cum bractea volumen (lΔV) ferebat gasi 0 in modum pulsus intrat laminam, tabellarius gas continens nm componentes in periodo gasi ad lamminam impellitur 1. Hoc tempore, ns componens in liquida periodo laminae 0 et nm component in gas periodo laminae 1 inter duo tempora distributa erit.Summa ergo partium quae in lamella 0 continentur est 0,5, in qua gas et phases liquidae singulae sunt 0.25, et summa in lammina 1 contenta est etiam 0,5.Gas et liquida incrementa etiam 0.25.
Hic processus quotienscumque iteratur, novum volumen tabellarius gasi in columna pulsatur (vide tabula infra).
(IV) aequatio curva chromatographica emersum
est mensura declinationis σ, est retentione temporis, c est remissio aliquando;
C, est intentio iniectio, hoc est, summa partium (cacumen A).
(5) columna parametri efficientiam
Ad constantem tR, minor W vel w 1/2 (id est apicem angustiorem), maior numerus laminarum theoricarum n, minor lamina theoricae altitudinis, superior columnae efficientia separatio.Idem valet de theoria effectiva lance neff.Ergo numerus theoricarum scutariorum est index ad columnarum efficientiam aestimandam.
(5) Notae et delicta
> Commoda
Ipsumque theoria semi-emirica est et figuram curvi fluxi explicat
Processus partitionis et divisionis partium illustrantur
Index aestimandi efficaciam columnae proponitur
> Limitationes
Partes revera non possunt aequilibrii distributionem in duobus gradibus attingere:
Longitudinalis diffusio partium in columna neglecta non potest;
Influentia variarum motuum in mole processuum translationis facta non reputabatur.
Relatio inter columnam effectum et fluere velocitatem temporis mobilis explicari non potest:
Non liquet quid causae principales effectum agminis afficiant
Haec problemata in theoria rate satis solvuntur.
2. Rate doctrina
Anno 1956, scolasticus Batavicus VanDeemter et al.notionem theoriae lance hausit, et factores motos qui altitudinem lance afficientes miscuerunt, theoriam chromatographici processus - rate theoriae cineticae theoriae proposuit et aequationem VanDeemter derivavit.Spectat processum chromatographicum ut processum dynamicum non-aequilibrium et influxum factorum motuum in apicem dilatationis (id est effectus columnae).
Postea Gidding et Snyder et al.Proposuit liquida chromatographia aequatio rate (aequatio Giddings nempe) fundata in aequatione VanDeemter (postea aequatio chromatographia gasi appellata) et secundum proprietatem differentiam inter liquidum et gas.
(1) Van Deemter equatione
Ubi: H: tabulae altitudo est
A: coëfficiens torrens diffusionis terminus
B: coefficiens terminus diffusionis hypotheticae
C: Coefficiens Missae terminus resistentiae translationis
(2) De aequatione Gidding
Analysis quantitatis et qualitatis
(1) Qualitativa analysis
Analysis qualitativa chromatographica determinet compositiones, quae ab unoquoque chromatographico apicem repraesentantur.Cum variae substantiae certae retentionis valores sub certis chromatographicis conditionibus habeant, retentio valor index qualitativus adhiberi potest.Varii methodi chromatographicae qualitativae nunc in retentione valorum nituntur.
Tamen diversae substantiae retentione similes vel identicae habere possunt valores sub iisdem condicionibus chromatographicis, id est, retentionis valores non exclusivae.Sic difficile est notificare specimen omnino ignotum in solis valoribus retentione.Si ex intelligendo fonte, natura et fine exempli, praevia compositionis specimen iudicium fieri potest, et sequentes methodi adhibendae sunt ad determinandum compositum a chromatographico apicem repraesentatum.
1. Qualitativa potestate utens pura substantia
Sub certis conditionibus chromatographicis ignotus tantum tempus retentionis definitum habet.Ignota igitur qualitas identificari potest, comparando retentionis tempus substantiae purae cognitae sub iisdem conditionibus chromatographicis cum retentio tempore substantiae ignotae.Si eaedem sunt, substantia ignota, ut cognoscatur substantia pura;Alioquin ignotum non est substantia pura.
Substantiae purae temperantiae modus non convenit nisi substantiae ignotae, cuius compositio nota est, cuius compositio est simplex relatio, et pura substantia cognoscitur.
2. Retentione relativa modum pretii
Retentio relativa valor α, refertur ad commensurationem inter i componentes et referentia materiae rationem valorum retentionis;
Mutat solum cum mutatione fixativae et columnae temperie, et nihil ad alias condiciones operativas pertinet.
Ad certum phase et columnae temperamentum stabile, valores retentionis componentium i et substantiae s adaptatae respective mensurantur, ac deinde iuxta formulam praedictam computantur.Obtenta relativa retentione valores qualitive comparari possunt cum valoribus correspondentibus in litteris.
3, Addens substantias notas ad modum altitudinis apicem augere
Cum multae partes in exemplo ignoto exstant, chromatographica cacumina consecuta nimis densa sunt ut facile per methodum praedictam cognoscatur, vel cum incogniti exempli causa tantum pro analysi determinato adhibeatur.
"Primum chromatogrammum ignoti exempli fit, et deinde chromatogrammum ulteriorem obtinet addita substantia nota exempli ignoti."Components aucto fastigio cacumina talibus substantiis cognosci possunt.
4. modum habe quale index
Index retentionis significat retentio mores substantiarum in fixativas et nunc latissime usus et internationalis index qualitativus in GC agnoscitur.Habet bona reproducibilitatis commoda, aequabile vexillum et parva temperies coefficientis.
Index retentio solum ad proprietates stationarii et columnae temperaturae refertur, non autem ad alias condiciones experimentales.Praeclara accuratio et reproducibilitas eius.Quamdiu temperatura columna eadem est ac stationarii periodi, litterae valor identificatio applicari potest, nec necesse est puram materiam comparationis adhibere.
(2) Analysis quantitatis
Fundamentum quantitatis chromatographicae:
Negotium analyseos quantitatis est invenire centum componentium in sample mixto
Contentus fractus.Quantitas chromatographica his innixa est: cum condiciones operating constantes essent
Missa (vel intentio) componentis mensurati determinatur per responsionem signo a detectore dato
Praesent ut ipsum.Nempe:
Fundamentum quantitatis chromatographicae:
Negotium analyseos quantitatis est invenire centum componentium in sample mixto
Contentus fractus.Quantitas chromatographica his innixa est: cum condiciones operating constantes essent
Missa (vel intentio) componentis mensurati determinatur per responsionem signo a detectore dato
Praesent ut ipsum.Nempe:
1. Pecco area mensurae modum
Area cacumen est notitia quantitatis fundamentalis per chromatogrammos provisum et accuratio mensurae cacuminis areae quantitatis eventus directe afficit.Diversi modi mensurae pro chromatographicis cacuminis adhibitae cum diversis cacuminis figuris.
Difficile est valorem hiemis in analysi quantitatis invenire;
Ex altera parte ob difficultatem iniectionis absolutam voluminis accurate metiendi: ex altera manu
Vertex area ab chromatographicis conditionibus dependet, et habena chromatographica conservari debet cum aestimatio mensuratur.
idem facere neque convenit neque potest.Et si ius accipere potes
De valore, etiam quia non est unum signum nec directe applicari potest.
2.Quantitative correctionis factor
Definition of quantitatis correctionis factor: quantitatis components intrantes detector (m)
Proportio culminis chromatographici eius areae (A) seu altitudinis cacuminis () est proportionalitas constans (,
Proportionalitas constans appellatur absoluta correctio factoris componentis.
Difficile est valorem hiemis in analysi quantitatis invenire;
Ex altera parte ob difficultatem iniectionis absolutam voluminis accurate metiendi: ex altera manu
Vertex area ab chromatographicis conditionibus dependet, et habena chromatographica conservari debet cum aestimatio mensuratur.
idem facere neque convenit neque potest.Et si ius accipere potes
De valore, etiam quia non est unum signum nec directe applicari potest.
Id est, factor relativa correctionis componentis est componentis et relatio materiae s .
Proportio absolutae correctionis factorum.
Ex his constare potest, quod relativum correctionis elementum est cum qualitas partis versus vexillum.
Cum substantia s aequalis sit, apicem area materialis referentiae est, apicem area componentis
Multiplices.Si pars aliqua habeat massam m et apicem areae A, erit numerus f'A*
Valores ad apicem areae materiae cum mole referentiae aequales sunt.In aliis verbis,
Per correctionem relativam factorem, apicem areae uniuscuiusque componentis separari possunt
Conversus ad apicem areae materiae aequalis massae suae referentiae, tum ratio
Vexillum adunatur.Haec igitur est methodus normalized ad instar recipis cujusvis componentis
Fundamentum quantitatis.
Modus obtinendi factorem correctionis relativam: valores factores relativi correctionis tantum comparati sunt cum ente
Mensura ad mensuram et genus detectoris refertur, operatio autem habena
Nihil refert.Valores igitur ex indiciis litterarum reperiri possunt.Si illud
Si valorem desideratum in oblatione invenire non potes, etiam a te ipso determinare potes.Modus determinationis
Methodus: Quadam quantitatem substantiae mensuratae decem selectas referentias materiales → factas in quandam concentrationem
Vertex chromatographicus areas A et As duorum partium metiebatur.
Haec formula.
3. Calculi quantitatis modum
(I) Area ordinationem modum
Summa contenti fractionum omnium ad apicem liberorum computata est sicut 100% pro quantitatis
Modus appellatur ordinatione.Ejus formula calculi talis est;
Ubi P,% recipis contentum partium probatarum;A1, A2... A n componens 1. Vertex area 1~n;f'1, f'2... f'n est correctio relativa facta pro componentibus 1 ad n.
(II) externum modum vexillum
Modus quantitatis comparationis inter responsionem signo componentis probatum in sample et pura componente ut temperantia probetur.
(III) Internum vexillum modum
Modus internus sic dictus modus est modus quo aliqua quantitas substantiae purae advenit solutioni mensurae substantiae probatae et solutionis exempli internae, ac deinde resolvitur et determinatur.
(III) vexillum praeter modum
Vexillum additionis methodi, etiam notae methodi additionis internae, certam quantitatem addere est (△C)
Relatio substantiae testi addita est solutioni exempli probati, et probatio ad primordium addita est
Vertex solutionis specimen post substantiam altior erat quam solutionis originalis specimen
Incrementum area (△A) computare solebat substantiae in solutione sample
Contentus (Cx)
Ubi Ax est cacumen areae substantiae mensurandae in exemplo originali.
Post tempus: Mar-27-2023